ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ

ഒരേസമയത്തുള്ള മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ ഇഫക്റ്റുകൾ സംയോജിപ്പിച്ച് എൻസൈമാറ്റിക് പ്രവർത്തനം മാറ്റുന്നത് എളുപ്പത്തിൽ പ്രവചിക്കാൻ കഴിയില്ല, കാരണം ഈ ഇഫക്റ്റുകൾ എല്ലായ്പ്പോഴും ഒരു രേഖീയ രീതിയിൽ കൂട്ടിച്ചേർക്കപ്പെടുന്നില്ല.അതിനാൽ, അടിവസ്ത്രത്തെ ബന്ധിപ്പിക്കുന്ന അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളുടെ ഒരേസമയം മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ ഫലങ്ങളുടെ സ്വഭാവം എൻസൈമുകളുടെ അടിവസ്ത്രത്തിന്റെ പ്രത്യേകത മനസ്സിലാക്കുന്നതിൽ കാര്യമായ സംഭാവന നൽകും.Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) ൽ നിന്നുള്ള ബീറ്റാ-ഗ്ലൈക്കോസിഡേസിൽ, അവശിഷ്ടങ്ങൾ Q39, E451 എന്നിവ അടിവസ്ത്രവുമായി ഇടപഴകുന്നു, ഇത് അടിവസ്ത്രത്തിന്റെ പ്രത്യേകത നിർവചിക്കുന്നതിന് അത്യന്താപേക്ഷിതമാണ്.Sfbetagly യുടെ (A451E39, S451E39, S451N39) ഇരട്ട മ്യൂട്ടന്റുകൾ സൈറ്റ്-ഡയറക്‌ടഡ് മ്യൂട്ടജെനിസിസ് വഴി തയ്യാറാക്കി, ബാക്ടീരിയയിൽ പ്രകടിപ്പിക്കുകയും അഫിനിറ്റി ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി ഉപയോഗിച്ച് ശുദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്തു.പി-നൈട്രോഫെനൈൽ ബീറ്റാ-ഗാലക്റ്റോസൈഡ്, പി-നൈട്രോഫെനൈൽ ബീറ്റാ-ഫ്യൂക്കോസൈഡ് എന്നിവ അടിവസ്ത്രങ്ങളായി ഉപയോഗിച്ചാണ് ഈ എൻസൈമുകളുടെ സവിശേഷത.Q39, E451 എന്നീ സ്ഥാനങ്ങളിൽ സൈറ്റ്-ഡയറക്‌ടഡ് മ്യൂട്ടേഷനുകൾ അടങ്ങിയ Sfbetagly-യുടെ സിംഗിൾ, ഡബിൾ മ്യൂട്ടന്റുകളുടെ k cat/Km അനുപാതം, ഇരട്ട മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ (Gdouble) ESdouble dagger (എൻസൈം-ട്രാൻസിഷൻ സ്റ്റേറ്റ് കോംപ്ലക്സ്) സ്വതന്ത്ര ഊർജ്ജത്തിൽ സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നുവെന്ന് തെളിയിക്കാൻ ഉപയോഗിച്ചു. daggerxy) എന്നത് ഒരൊറ്റ മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ഫലങ്ങളുടെ ആകെത്തുകയല്ല (Gdouble daggerx, Gdouble daggery).Gdouble dagger-ലെ ഈ വ്യത്യാസം സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ഒറ്റ മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ ഫലങ്ങൾ ഭാഗികമായി ഓവർലാപ്പ് ചെയ്യുന്നു എന്നാണ്.അതിനാൽ, ഈ പൊതു പ്രഭാവം Gdouble daggerxy-യിൽ ഒരിക്കൽ മാത്രമേ കണക്കാക്കൂ.ബീറ്റാ-ഗ്ലൈക്കോസിഡേസുകളിലെ ക്രിസ്റ്റലോഗ്രാഫിക് ഡാറ്റ, അവശിഷ്ടങ്ങൾ Q39, E451 എന്നിവയും സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റിന്റെ അതേ ഹൈഡ്രോക്‌സൈൽ ഗ്രൂപ്പും ഉൾപ്പെടുന്ന ഒരു ബൈഡന്റേറ്റ് ഹൈഡ്രജൻ ബോണ്ടിന്റെ സാന്നിധ്യം വെളിപ്പെടുത്തുന്നു.അതിനാൽ, തെർമോഡൈനാമിക്, ക്രിസ്റ്റലോഗ്രാഫിക് ഡാറ്റകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് അവശിഷ്ടങ്ങൾ Q39, E451 എന്നിവ അടിവസ്ത്രവുമായുള്ള അവയുടെ പരസ്പര ഇടപെടലുകളിൽ പരസ്പര സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നു എന്നാണ്.