ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ

മൈക്രോബയൽ ഹോസ്റ്റിന്റെ മെറ്റബോളിസം മനസ്സിലാക്കുന്നത് മുഴുവൻ കോശങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ബയോകാറ്റലിറ്റിക് പ്രക്രിയകളുടെ വികസനത്തിനും ഒപ്റ്റിമൈസേഷനും അത്യന്താപേക്ഷിതമാണ്, കാരണം ഇത് ഉൽപ്പാദനക്ഷമതയെ നിർദ്ദേശിക്കുന്നു.ആതിഥേയത്തിലെ കോഫാക്ടർ/കോസബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് പുനരുൽപ്പാദന ശേഷി എൻഡോജെനസ് കാരണം ഉപാപചയപരമായി സജീവമായ കോശങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന റെഡോക്സ് ബയോകാറ്റാലിസിസിന് ഇത് പ്രത്യേകിച്ചും സത്യമാണ്.പ്രോലിൻ-4-ഹൈഡ്രോക്‌സിലേസ് (P4H) എന്ന ഡയോക്‌സിജനേസ് അമിതമായി ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്നതിന് റീകോമ്പിനന്റ് എസ്ഷെറിച്ചിയ കോളി ഉപയോഗിച്ചു, ഇത് സ്വതന്ത്ര എൽ-പ്രോലിനിന്റെ ഹൈഡ്രോക്‌സൈലേഷനെ ട്രാൻസ്-4-ഹൈഡ്രോക്‌സി-എൽ-പ്രോലിനാക്കി എ-കെറ്റോഗ്ലൂട്ടറേറ്റ് (എ-കെജി) കോസബ്‌സ്‌ട്രേറ്റായി ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നു.ഈ മുഴുവൻ-സെൽ ബയോകാറ്റലിസ്റ്റിൽ, സെൻട്രൽ കാർബൺ മെറ്റബോളിസം ആവശ്യമായ കോസബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് a-KG നൽകുന്നു, ഇത് P4H ബയോകാറ്റലിറ്റിക് പ്രകടനത്തെ നേരിട്ട് കാർബൺ മെറ്റബോളിസത്തിലേക്കും ഉപാപചയ പ്രവർത്തനത്തിലേക്കും ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു.മെറ്റബോളിക് എഞ്ചിനീയറിംഗ്, (13)സി-മെറ്റബോളിക് ഫ്ലക്സ് അനാലിസിസ് ((13)സി-എംഎഫ്എ) പോലെയുള്ള പരീക്ഷണാത്മകവും കമ്പ്യൂട്ടേഷണൽ ബയോളജി ടൂളുകളും പ്രയോഗിക്കുന്നതിലൂടെ, മുഴുവൻ സെൽ ബയോകാറ്റലിസ്റ്റിന്റെ ഫിസിയോളജിക്കൽ, മെറ്റബോളിക്, ബയോ എനർജറ്റിക് പ്രതികരണം ഞങ്ങൾ അന്വേഷിക്കുകയും അളവനുസരിച്ച് വിവരിക്കുകയും ചെയ്തു. ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത ബയോകൺവേർഷനിലേക്ക്, കൂടുതൽ യുക്തിസഹമായ പാത്ത്‌വേ എഞ്ചിനീയറിംഗിനായി സാധ്യമായ ഉപാപചയ തടസ്സങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. പുട്ട്‌എ ജീൻ എൻകോഡിംഗ് പ്രോലൈൻ ഡീഹൈഡ്രോജനേസ് ഇല്ലാതാക്കുന്നതിലൂടെ ഒരു പ്രോലൈൻ ഡീഗ്രേഡേഷൻ-ഡിഫിഷ്യന്റ് ഇ.ഈ മ്യൂട്ടന്റ് സ്‌ട്രെയ്‌നോടുകൂടിയ മുഴുവൻ-സെൽ ബയോ ട്രാൻസ്‌ഫോർമേഷനുകൾ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പ്രോലൈൻ ഹൈഡ്രോക്‌സൈലേഷന് മാത്രമല്ല, വൈൽഡ് തരവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ നിർദ്ദിഷ്ട ട്രാൻസ്-4-എൽ-ഹൈഡ്രോക്‌സിപ്രോലിൻ (ഹൈപ്പ്) രൂപീകരണ നിരക്ക് ഇരട്ടിയാക്കാനും കാരണമായി.മ്യൂട്ടന്റ് സ്‌ട്രെയിനിന്റെ സെൻട്രൽ മെറ്റബോളിസത്തിലൂടെയുള്ള കാർബൺ ഫ്‌ളക്‌സിന്റെ വിശകലനം, P4H പ്രവർത്തനത്തിനായുള്ള വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന a-KG ഡിമാൻഡ്, a-KG ജനറേറ്റിംഗ് ഫ്‌ളക്‌സിനെ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നില്ലെന്ന് കണ്ടെത്തി, ഇത് പഠിച്ച വ്യവസ്ഥകളിൽ കർശനമായി നിയന്ത്രിത TCA സൈക്കിൾ പ്രവർത്തനത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.വൈൽഡ് ടൈപ്പ് സ്‌ട്രെയിനിൽ, P4H സിന്തസിസും കാറ്റലിസിസും ബയോമാസ് വിളവ് കുറയുന്നതിന് കാരണമായി.രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ΔputA സ്ട്രെയിൻ ടിസിഎ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനുപകരം താരതമ്യേന കുറഞ്ഞ ഗ്ലൂക്കോസ് ആപ്‌ടേക്ക് നിരക്കിൽ മെയിന്റനൻസ് എനർജി ഡിമാൻഡ് കുറച്ചുകൊണ്ട് അനുബന്ധ എടിപി, എൻഎഡിഎച്ച് നഷ്ടം നികത്തുന്നു. ബയോ ട്രാൻസ്‌ഫോർമേഷൻ വിളവിന്റെ കാര്യത്തിൽ മാത്രമല്ല, ബയോ ട്രാൻസ്‌ഫോർമേഷൻ, പ്രോലിൻ ആപ്‌ടേക്ക്, ഊർജ സ്രോതസ്സിലെ ഹൈപ്പിന്റെ വിളവ് എന്നിവയെ സംബന്ധിച്ചും ഉൽപ്പാദനക്ഷമമായ P4H കാറ്റലിസിസ് വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു.ഒരു പുട്ട്‌എ നോക്കൗട്ടിൽ, കോസബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് എ-കെജി വഴി പ്രോലൈൻ ഹൈഡ്രോക്‌സൈലേഷനുമായി ടിസിഎ-സൈക്കിളിന്റെ സംയോജനം ഒരു-കെജി-ആശ്രിത ബയോ ട്രാൻസ്‌ഫോർമേഷനുകളുടെ കാര്യക്ഷമത കൂടുതൽ മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിനുള്ള ഒരു പ്രധാന ഘടകമായി മാറുകയും ലക്ഷ്യമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.