ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluoro-2'-C-methylcytidine (PSI-6130) Huh-7 റെപ്ലിക്കൺ കോശങ്ങളിലെ ഹെപ്പറ്റൈറ്റിസ് സി വൈറസിന്റെ (HCV) RNA സിന്തസിസിന്റെ ശക്തമായ ഒരു പ്രത്യേക ഇൻഹിബിറ്ററാണ്.HCV NS5B RNA പോളിമറേസ് തടയാൻ, PSI-6130 5'-triphosphate രൂപത്തിലേക്ക് ഫോസ്ഫോറിലേറ്റ് ചെയ്തിരിക്കണം.PSI-6130 ന്റെ ഫോസ്ഫോറിലേഷനും HCV NS5B യുടെ തടസ്സവും അന്വേഷിച്ചു.റികോമ്പിനന്റ് ഹ്യൂമൻ 2'-ഡിയോക്‌സിസിറ്റിഡിൻ കൈനസ് (ഡിസികെ), യൂറിഡിൻ-സിറ്റിഡിൻ കൈനസ് 1 (യുസികെ-1) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് PSI-6130-ന്റെ ഫോസ്‌ഫോറിലേഷൻ ഒരു കപ്പിൾഡ് സ്പെക്‌ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് റിയാക്ഷൻ ഉപയോഗിച്ചാണ് അളക്കുന്നത്.PSI-6130 ശുദ്ധീകരിക്കപ്പെട്ട dCK-യുടെ ഒരു അടിവസ്ത്രമായി കാണപ്പെട്ടു, 81 മൈക്രോഎം കി.മീറ്ററും ഒരു kcat 0.007 s-1 ഉം ആണ്, എന്നാൽ UCK-1-ന്റെ ഒരു സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് ആയിരുന്നില്ല.PSI-6130 മോണോഫോസ്ഫേറ്റ് (PSI-6130-MP) യഥാക്രമം ഡിഫോസ്ഫേറ്റിലേക്കും തുടർന്ന് ട്രൈഫോസ്ഫേറ്റിലേക്കും യഥാക്രമം റീകോമ്പിനന്റ് ഹ്യൂമൻ യു‌എം‌പി-സി‌എം‌പി കൈനാസും ന്യൂക്ലിയോസൈഡ് ഡിഫോസ്ഫേറ്റ് കൈനസും ഉപയോഗിച്ച് ഫോസ്‌ഫോറിലേറ്റ് ചെയ്തു.വൈൽഡ്-ടൈപ്പ്, മ്യൂട്ടേറ്റഡ് (S282T) HCV NS5B RNA പോളിമറേസുകളുടെ തടസ്സം പഠിച്ചു.വൈൽഡ്-ടൈപ്പ് എൻസൈമിനൊപ്പം PSI-61 30 ട്രൈഫോസ്ഫേറ്റിന്റെ (PSI-6130-TP) സ്റ്റേഡി-സ്റ്റേറ്റ് ഇൻഹിബിഷൻ കോൺസ്റ്റന്റ് (Ki) 4.3 മൈക്രോഎം ആയിരുന്നു.2'-C-methyladenosine triphosphate (Ki=1.5 microM), 2'-C-methylcytidine triphosphate (Ki=1.6 microM) എന്നിവയിൽ സമാനമായ ഫലങ്ങൾ ലഭിച്ചു.S282T മ്യൂട്ടേഷനോടുകൂടിയ NS5B, 2'-C-methyladenosine-ന് പ്രതിരോധം നൽകുന്നതായി അറിയപ്പെടുന്നു, ഇത് വൈൽഡ് ടൈപ്പ് പോലെ കാര്യക്ഷമമായി PSI-6130-TP തടഞ്ഞു.ശുദ്ധീകരിച്ച NS5B RNA പോളിമറേസ് ഉൽപ്രേരിപ്പിച്ച RNA-യിൽ PSI-6130-MP സംയോജിപ്പിച്ചത് ചെയിൻ അവസാനിപ്പിക്കുന്നതിൽ കലാശിച്ചു.