ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ

മറ്റ് പോസിറ്റീവ്-സ്ട്രാൻഡ് ആർഎൻഎ വൈറസുകൾക്ക് സമാനമായി, ടോംബസ് വൈറസുകൾ മെംബ്രൺ-ബൗണ്ട് വൈറൽ റെപ്ലിക്കേസ് കോംപ്ലക്സ് (വിആർസി) വഴി പകർത്തുന്നു.VRC-ൽ p92 വൈറസ്-കോഡഡ് RNA-ആശ്രിത RNA പോളിമറേസ് (RdRp), വൈറൽ p33 RNA ചാപ്പറോണും നിരവധി സഹ-ഓപ്‌റ്റഡ് ഹോസ്റ്റ് പ്രോട്ടീനുകളും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.അതിന്റെ വിവർത്തനത്തിന് ശേഷം ഒരു ഫങ്ഷണൽ RdRp ആകുന്നതിന്, p92 റെപ്ലിക്കേഷൻ പ്രോട്ടീൻ VRC-യിൽ ഉൾപ്പെടുത്തണം, തുടർന്ന് അത് സജീവമാക്കണം.ടൊമാറ്റോ ബുഷി സ്റ്റണ്ട് വൈറസിന്റെ (TBSV) RdRp സജീവമാക്കുന്നതിന് ഒരു ലയിക്കുന്ന ഹോസ്റ്റ് ഫാക്‌ടർ (കൾ) ആവശ്യമാണെന്ന് സെൽ-ഫ്രീ യീസ്റ്റ് എക്‌സ്‌ട്രാക്‌റ്റ് അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള പരിശോധനയിൽ ഞങ്ങൾ മുമ്പ് കാണിച്ചിരുന്നു.ഈ ലേഖനത്തിൽ, സെല്ലുലാർ ഹീറ്റ് ഷോക്ക് പ്രോട്ടീൻ 70 (Hsp70) ഒരു N-ടെർമിനലായി വെട്ടിച്ചുരുക്കിയ റീകോമ്പിനന്റ് TBSV RdRp സജീവമാക്കുന്നതിന് ആവശ്യമായ കോ-ഓപ്‌റ്റഡ് ഹോസ്റ്റ് ഘടകമായി ഞങ്ങൾ തിരിച്ചറിയുന്നു.കൂടാതെ, എച്ച്‌എസ്‌പി 70 ഫംഗ്‌ഷന്റെ ചെറിയ തന്മാത്രകൾ അധിഷ്‌ഠിത തടയുന്നത് ടോംബുസ്‌വൈറസ് ആർഡിആർപി ഇൻ വിട്രോയുടെ ആർഎൻഎ സിന്തസിസിനെ തടയുന്നു.കൂടാതെ, ന്യൂട്രൽ ഫോസ്ഫോളിപ്പിഡുകൾ, അതായത്, ഫോസ്ഫാറ്റിഡൈലെത്തനോലമൈൻ (PE), ഫോസ്ഫാറ്റിഡൈൽകോളിൻ (PC) എന്നിവ വിട്രോയിലെ RdRp സജീവമാക്കൽ വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്ന് ഞങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു.നേരെമറിച്ച്, ഫോസ്ഫാറ്റിഡൈൽഗ്ലിസറോൾ (പിജി) ഇൻ വിട്രോ ആർഡിആർപി ആക്ടിവേഷനിൽ ശക്തവും പ്രബലവുമായ തടസ്സം കാണിക്കുന്നു.പിഇയും പിസിയും ആർഡിആർപി-വൈറൽ പ്ലസ്-സ്ട്രാൻഡ് ആർഎൻഎ [(+)ആർഎൻഎ] ഇടപെടലിനെ ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നുവെന്നും ഞങ്ങൾ തെളിയിക്കുന്നു, അതേസമയം പിജി വൈറൽ ആർഎൻഎയെ ആർഡിആർപിയുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നത് തടയുന്നു.Tombusvirus RdRp ആക്ടിവേഷനിലെ വിവിധ ഫോസ്ഫോളിപ്പിഡുകളുടെ ഉത്തേജകവും തടസ്സപ്പെടുത്തുന്നതുമായ റോളുകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, അണുബാധയുടെ സമയത്ത് പുതിയ VRC അസംബ്ലി നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത ഉപസെല്ലുലാർ മെംബ്രണുകളുടെ ലിപിഡ് കോമ്പോസിഷൻ ടോംബസ് വൈറസുകൾ ഉപയോഗിച്ചേക്കാമെന്ന് ഞങ്ങൾ നിർദ്ദേശിക്കുന്നു. (RdRp), നിരവധി പോസിറ്റീവ്-സ്ട്രാൻഡ് RNA വൈറസുകളുടെ രോഗബാധിതമായ കോശങ്ങളിലെ വൈറൽ RNA സന്തതികളെ സമന്വയിപ്പിക്കുന്നതിന് ഉത്തരവാദിയാണ്, ഇത് തുടക്കത്തിൽ നിഷ്ക്രിയമാണ്.ഈ തന്ത്രം സൈറ്റോസോളിലെ വൈറൽ ആർഎൻഎ സിന്തസിസ് ഒഴിവാക്കാൻ സാധ്യതയുണ്ട്, ഇത് ആർഎൻഎ-ട്രിഗർ ചെയ്‌ത സെല്ലുലാർ ആൻറിവൈറൽ പ്രതികരണങ്ങളുടെ ഇൻഡക്ഷനിലേക്ക് അതിവേഗം നയിക്കും.മെംബ്രൺ-ബൗണ്ട് റെപ്ലിക്കേസ് കോംപ്ലക്‌സിന്റെ അസംബ്ലി സമയത്ത്, ആർ‌എൻ‌എ സമന്വയത്തിന് RdRp-യെ പ്രാപ്‌തമാക്കുന്ന അപൂർണ്ണമായി മനസ്സിലാക്കിയ ഒരു പ്രക്രിയയിലൂടെ വൈറൽ RdRp സജീവമാകുന്നു.TBSV RdRp ഉപയോഗിക്കുന്നതിലൂടെ, കോ-ഓപ്‌റ്റഡ് സെല്ലുലാർ Hsp70 ചാപ്പറോണും ന്യൂട്രൽ ഫോസ്‌ഫോളിപ്പിഡുകളും വിട്രോയിൽ RdRp സജീവമാക്കൽ സുഗമമാക്കുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു.നേരെമറിച്ച്, ഫോസ്ഫാറ്റിഡൈൽഗ്ലിസറോൾ (PG) ഇൻ വിട്രോ RdRp ആക്ടിവേഷനിലും RdRp-വൈറൽ RNA ഇന്ററാക്ഷനിലും പ്രബലമായ ഒരു തടസ്സം സൃഷ്ടിക്കുന്നു, ഇത് RdRp-യെ ചുറ്റിപ്പറ്റിയുള്ള മെംബ്രണസ് മൈക്രോഡൊമെയ്ൻ RNA സിന്തസിസിനുള്ള അതിന്റെ കഴിവിനെ വളരെയധികം ബാധിക്കുന്നുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു.അതിനാൽ, വൈറൽ RdRp സജീവമാക്കുന്നത് രോഗബാധിതമായ കോശങ്ങളിലെ ഒന്നിലധികം ഹോസ്റ്റ് ഘടകങ്ങളെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കും.