ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ

പരിക്രമണ ഫൈബ്രോബ്ലാസ്റ്റുകളെ പ്രായപൂർത്തിയായ അഡിപ്പോസൈറ്റുകളായി വേർതിരിക്കുന്നതും തുടർന്നുള്ള അഡിപ്പോസ് ടിഷ്യുവിന്റെ ശേഖരണവും ഗ്രേവ്സ് ഓർബിറ്റോപതിയുടെ (GO) പുരോഗതിയിൽ കാണിക്കുന്നു.അഡിപോജെനിസിസിൽ ഓട്ടോഫാഗി ഉൾപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്, എന്നാൽ GO യുടെ തുടക്കത്തിലും പുരോഗതിയിലും ഓട്ടോഫാഗിയുടെ പങ്കിനെക്കുറിച്ച് വളരെക്കുറച്ചേ അറിയൂ.ഈ പഠനത്തിന്റെ ലക്ഷ്യം GO യുടെ രോഗകാരികളിൽ ഓട്ടോഫാഗിയുടെ പങ്ക് അന്വേഷിക്കുക എന്നതാണ്. GO ഉള്ള രോഗികളിൽ നിന്നും സാധാരണ വിഷയങ്ങളിൽ നിന്നും ഓർബിറ്റൽ അഡിപ്പോസ് / കണക്റ്റീവ് ടിഷ്യു എക്സ്പ്ലാന്റുകൾ, അതുപോലെ ഒറ്റപ്പെട്ട പരിക്രമണ ഫൈബ്രോബ്ലാസ്റ്റുകൾ എന്നിവ വിശകലനം ചെയ്തു.ഹൈഡ്രജൻ പെറോക്‌സൈഡ് ഉപയോഗിച്ചോ അല്ലാതെയോ വ്യത്യാസപ്പെടുത്തുന്ന മാധ്യമം ഉപയോഗിച്ച് അഡിപൊജെനിസിസ് പ്രേരിപ്പിച്ചു, കൂടാതെ ബാഫിലോമൈസിൻ A1, Atg5- ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത ഷോർട്ട് ഹെയർപിൻ ആർ‌എൻ‌എ (shRNA) എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഓട്ടോഫാഗി കൃത്രിമമായി കൈകാര്യം ചെയ്തു.ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി വഴിയാണ് ഓട്ടോഫാഗോസോമുകൾ തിരിച്ചറിഞ്ഞത്.തത്സമയ റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ-പോളിമറേസ് ചെയിൻ റിയാക്ഷൻ കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ട് അനാലിസിസ് വഴി ഓട്ടോഫാഗിയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ജീനുകളുടെ പ്രകടനവും അഡിപോജെനിസിസുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകങ്ങളും വിശകലനം ചെയ്തു.ലിപിഡ് ഡ്രോപ്ലെറ്റ് ശേഖരണം ഓയിൽ റെഡ് ഒ സ്റ്റെയിനിംഗ് വഴി പരിശോധിച്ചു.ഓട്ടോഫാജിക് വാക്യൂളുകൾ GO ഇതര സെല്ലുകളേക്കാൾ GO സെല്ലുകളിൽ കൂടുതലായിരുന്നു (p<0.05).ഓട്ടോഫാഗിയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ജീനുകളുടെ പ്രകടനങ്ങൾ യഥാക്രമം GO ടിഷ്യൂകളിലും കോശങ്ങളിലും അവയുടെ നോൺ-GO എതിരാളികളേക്കാൾ വളരെ കൂടുതലാണ്.Interleukin-1β, GO സെല്ലുകളിൽ LC3-II, p62, Atg7 പ്രോട്ടീൻ വർദ്ധിപ്പിച്ചു.ലിപിഡ് ഡ്രോപ്ലെറ്റ് രൂപീകരണത്തോടൊപ്പം അഡിപോജെനിസിസിന്റെ നാലാം ദിവസം ഓട്ടോഫാഗോസോം ശേഖരണം കാണിക്കുകയും 10-ാം ദിവസം കുറയുകയും ചെയ്തു.48 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ LC3, p62 പ്രോട്ടീനുകളുടെ ആവിഷ്‌കാരം വ്യത്യസ്‌തമായി വർദ്ധിക്കുകയും 4 മുതൽ 10 ദിവസം വരെ ക്രമേണ കുറയുകയും ചെയ്‌തു. ബാഫിലോമൈസിൻ A1 ചികിത്സയും shRNA വഴിയുള്ള Atg5 നാക്ക്‌ഡൗണും ലിപിഡ് ഡ്രോപ്ലെറ്റ് ശേഖരണവും അഡിപ്പോജെനിക് മാർക്കറുകളുടെ അടിച്ചമർത്തപ്പെട്ട പ്രകടനവും തടഞ്ഞു. നോൺ-GO ടിഷ്യൂകളും കോശങ്ങളും, GO രോഗകാരികളിൽ ഓട്ടോഫാഗി ഒരു പങ്കു വഹിക്കുന്നുവെന്ന് നിർദ്ദേശിക്കുന്നു.ഓട്ടോഫാഗി കൃത്രിമത്വം GO-യുടെ ഒരു ചികിത്സാ ലക്ഷ്യമായിരിക്കാം.